RP HPLC de peptídeos e proteínas

A separação de compostos de alto peso molecular é muito difícil, se é que é possível, em condições isocráticas, sendo necessária a eluição por gradiente. A teoria da eluição por gradiente para moléculas pequenas está bem estabelecida; no entanto, as suas aplicações em separações por gradiente de fase reversa de biopolímeros não são simples devido a problemas específicos, tais como difusão lenta, acessibilidade limitada da fase estacionária para moléculas maiores ou possíveis alterações na conformação da amostra durante a eluição. A cromatografia líquida de alta eficiência tem sido utilizada para investigar o comportamento cromatográfico de fase reversa de diferentes proteínas. Utilizando um sistema de água/solvente orgânico/ácido trifluoroacético, foi examinada a influência dos parâmetros experimentais; os resultados cromatográficos de diferentes suportes de fase estacionária foram comparáveis.