Desenvolvimento da proteína UL30 recombinante do vírus enterite pato

A enterite viral do pato, causada pelo vírus da enterite do pato (DEV), é uma doença aguda, contagiosa e letal. O DEV está atualmente classificado como pertencente à subfamília Alphaherpesvirinae da família Herpesviridae. A DNA polimerase, um produto da UL30, reveste-se de importância central para o sucesso da replicação viral no grupo de vírus Alphaherpesvirinae. A enzima viral está envolvida nos eventos iniciais dos processos de amplificação genética. A proteína UL30 é altamente conservada entre os herpesvírus ao nível da sequência de aminoácidos. Esta é uma das proteínas importantes para a replicação do vírus na célula hospedeira. As sequências de ADN que codificam a UL30 foram identificadas a partir do ADN genómico do DEV. Neste trabalho, desenvolvemos uma proteína UL30 recombinante do DEV a partir de um sistema procariótico. A proteína recombinante expressa, obtida como uma proteína de fusão com etiqueta de histidina, foi purificada por cromatografia de afinidade. A proteína recombinante purificada foi confirmada por SDS-PAGE e análise por western blot utilizando soros anti-DEV, que detetaram uma banda proteica de 80 kDa no blot. A proteína recombinante foi posteriormente submetida a diálise e concentrada utilizando filtros Amicon, tendo-se verificado que o rendimento total da proteína era de 120 µg/ml.